Während des Experiments konnten aufgrund der unterschiedlichen Eigenschaften der Probe nur die gewünschten Ergebnisse der Trennungsreinigung erzielt werden, wenn die richtige Zentrifugalmethode gewählt wurde. Die häufig verwendeten Zentrifugalmethoden sind hauptsächlich die Differenzzentrifugationsmethode und die Dichtegradentzentrifugalmethode. Die Dichtegradientenzentrifuge kann wiederum in Geschwindigkeitszonen mit Zentrifuge und Gleichdichtegradientenzentrifuge unterteilt werden. Diese Ausgabe präsentiert Ihnen die Differenzzentrifugation der Zentrifugenmethode.

Differenzzentrifugationsmethode

Die Differenzgeschwindigkeitszentrifugationsmethode wird auch als Differenzkrafttrennung bezeichnet.

Prinzip der Differenzzentrifugation

Verwenden Sie die Unterschiede in den Ablagerungskoeffizienten der einzelnen Komponenten in der Probe, um verschiedene Partikel unterschiedliche Zentrifugalkraft auszuüben, nach mehreren Zentrifugalzeiten wird die Zentrifugalgeschwindigkeit allmählich erhöht, um verschiedene Partikel nacheinander abzulegen, um die Zentrifugaltrennung zu erreichen.

Das Prinzip der Differenzzentrifugation kann mit dem Ausdruck der Zentrifugikraft beschrieben werden: F = ma, wobei a = ω2R.

Aufgrund der geringen Partikelmasse der kleinen Partikelgröße ist die Trennkraft bei der Trennung groß. Um den Bedarf an großen Zentrifugalkräften gerecht zu werden, muss die Drehgeschwindigkeit erhöht werden, um getrennt zu werden. Die Trennung verschiedener Partikelgrößen mit unterschiedlichen Zentrifugalkräften ist eine dynamische Trennungsmethode, insbesondere Partikel mit größeren Ablagegeschwindigkeiten, die diese Trennungsmethode verwenden.

Wenn es in der getrennten Probe große und kleine Partikel mit drei verschiedenen Partikelgrößen gibt, werden sie mit unterschiedlicher Zentrifugalkraft ausgeübt, werden Partikel mit großer Partikelgröße, deren Masse größer ist, zuerst abgelegt; Trennen Sie die Oberflüssigkeit, um die Oberflüssigkeit mit einer größeren Drehzahl eine zweite Zentrifuge durchzuführen, und die Partikel werden getrennt; Dann mit größerer Zentrifugalkraft und höherer Drehzahl aufnehmen und anschließend kleine Partikel absenken, um die Trennung der verschiedenen Partikel zu erreichen, wie in Abbildung 1 gezeigt.

Abbildung 1 Differenzzentrifugation

Da die Niederlage jedes Teilchens insgesamt einige Sekundärpartikel enthält, muss die Niederlage dieses Teilchens verdünnt und dann zentrifugiert werden, um eine Partikel der idealen Reinheit herzustellen.

Vorteile und Nachteile der Differenzzentrifugationsmethode

Die Differenzzentrifuge wird hauptsächlich zur Trennung von Partikeln mit größeren Durchmesser- und Dichtenunterschieden verwendet, deren Vorteil besteht in der kurzen Trennzeit, der hohen Wiederholbarkeit und der großen Probenverarbeitung, die für die erste Trennung einer großen Anzahl von Proben verwendet werden kann.

Bei der Trennung komplexer Proben mit Differenzzentrifugation oder bei hohen Anforderungen an die Trennreiheit wird jedoch mehrmals Zentrifuge durchgeführt und der Betrieb kompliziert sein. Zweitens kann aufgrund der mehrfachen Reinigung, Auflösung und Wiederauffällung der Niederlage leicht Zwischenverluste verursachen und das Problem der schlechten Zentrifugallösung verursachen; Darüber hinaus kann die Trennung bei der tatsächlichen Trennung aufgrund der Konversion bei der Zentrifuge, der Diffusion und der Verschmutzung bei der Aufladung von Abfällen nicht für einige Komponenten mit geringen Abfällungskoeffizienten durchgeführt werden. Aufgrund der Einschränkungen in Bezug auf die Reinheit und die Rückgewinnungsrate der Probe wird die Differenzzentrifugation hauptsächlich für die vorläufige Trennung von großen Mengen an Proben verwendet, um den nächsten Test oder Experiment vorzubereiten.

Zum Beispiel können wir mehrere verschiedene relative Zentrifuge- und Fällungskraft- und Schritt-für-Schritt-Sammlung von tierischen Lebergewebe-Homogenen durchführen, um eine vorläufige Isolierung von Zellkernen, Mitochondrien, Lysosomen und Ribosomen für weitere Tests oder feine Reinigungsexperimente für den nächsten Schritt zu erhalten. Die spezifischen Verarbeitungsprozesse sind wie folgt:

Zentrifugalklassen sind in Serie, bleiben Sie auf der Suche nach mehr Zentrifugalmethoden!