NEB M0202S T4 DNA Konnektase 20000U

Eigenschaften

■ Effiziente Verbindung von klebrigen Enden und Enden
T/A Klonen
dsDNA Schnitt Reparatur
■ Erstellen einer reichhaltigen Klonbibliothek
Verbindungen zwischen RNA und DNA

NEB M0202S T4 DNA Konnektase 20000U

Übersicht

Das Enzym katalysiert benachbarte 5'-Phosphorsäure- und 3'-Hydroxy-Enden auf doppelkettiger DNA oder RNA zur Bildung von Phosphodiesterbindungen. Das Enzym katalysiert nicht nur Verbindungen zwischen flachen oder klebrigen Enden, sondern repariert auch Einzelkettige Schnitte in doppelkettigen DNA-, RNA- oder DNA/RNA-Hybriden.

Quellen

Reinigung selbstE. coliC600 pcl857 pPLc28 lig8.

Reaktionsbedingungen

1X T4 DNA Connectase Reaktionspuffer
[50 mM Tris-HCl (pH 7,5 bei 25 °C), 10 mM MgCl2, 10 mM DTT, 1 mM ATP]. * DNA 5' Endkonzentration 0,1-1,0 μM bei 16 ° C.
Hitzeaktivierung: 65 ° C für 10 Minuten.

Einheitsdefinition (klebrige endaktive Einheit)

1 Einheit bezieht sich auf die Menge an Enzymen, die erforderlich sind, um 50% der durch HindIII verdauten λ-DNA-Fragmente [5'-Endkonzentration von 0,12 μM (300 μg/ml)] in 20 μl 1X T4-DNA-Konnektase-Reaktionspuffer bei 16 °C zu verbinden.

Konzentration

400.000 Einheiten/ml und 2.000.000 Einheiten/ml.

Hinweise

undE. coliDNA-Konnektase erfordern NAD+ als Cofaktor im Gegensatz zu T4-DNA-Konnektase, der ATP ist.

Das verdünnte T4-DNA-Konnektase sollte in einem 50%-igen Glycerin-Lagerpuffer (Verdünnungspuffer A, NEB #B8001) bei -20°C aufbewahrt werden. Wenn sofort nach der Verdünnung verwendet wird, kann es auch mit 1X T4 DNA Connectase Reaktionspuffer verdünnt werden.

Durch Zusatz von 1 mM ATP in das Reaktionssystem kann die Verbindungsreaktion in den vier restriktiven Endochetase-Puffern von NEB oder in

Die T4-DNA-Polynucleotidkinase-Reaktion wird in einem Puffer durchgeführt.

T4 DNA-Konnektase

Warennummer

Spezifikationen

Preis

Bestand in Peking

Shanghai Lager

#M0202L

100.000 Einheiten

haben

haben

#M0202M

(hohe Konzentration 5X) 100.000 Einheiten

haben

haben

#M0202S

20.000 Einheiten

haben

haben

#M0202T

(hohe Konzentration 5X) 20.000 Einheiten

haben

haben

#M0202V

10.000 Einheiten

haben

haben